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血紅素操作步驟
1．血紅素制備與純化
（1）新鮮豬血抗凝新鮮豬血，加入0.5%～1%檸檬酸三鈉溶液（V/V=10：1），攪拌均勻，得新鮮抗凝豬血。
（2）分離紅細(xì)胞取抗凝豬血10 mL于離心管中，以3 000 r/min離心15 min，傾出上清液（血漿），收集紅細(xì)胞，用0.9%NaCl洗滌2次。洗滌方法為：用適量生理鹽水懸浮紅細(xì)胞，攪拌均勻，離心，收集紅細(xì)胞沉淀，測定紅細(xì)胞體積（mL）。
（3）溶血加入相當(dāng)于紅細(xì)胞體積1倍的去離子水、0.25倍95%乙醇，攪拌30 min，紅細(xì)胞吸水脹裂，血紅蛋白釋放出來。
（4）分離血紅蛋 白溶血后加人紅細(xì)胞體積0.15倍的氯仿，攪拌15 min，離心，得到含血紅蛋白的沉淀物。
（5）分離血紅素 上述沉淀物中加入相等于紅細(xì)胞體積的0.15%亞硫酸氫鈉溶液，使其溶解，然后加入紅細(xì)胞體積4倍的丙酮，攪拌均勻，用0.1 mol/L鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH為3，使珠蛋白與血紅素充分分離（抽提時(shí)間為10 min以上），然后4000 r/min離心10 min，棄沉淀，上清液即為血紅素丙酮溶液。
（6）血紅素純化 血紅素丙酮溶液采用真空濃縮并回收丙酮，濃縮物用0.1 mol/L NaOH溶解，3 000 r/min離心10 min，收集上清液。用0.1 mol/L鹽酸調(diào)pH至4～5，沉淀血紅素，收集沉淀，用水洗沉淀至中性，50℃真空干燥至恒重，得血紅素。測定血紅素制品的重量（mg）。
2．血紅素測定
以0.1 mol/L NaOH分別溶解血紅素標(biāo)準(zhǔn)品和提取得到的血紅素制品，調(diào)整至適宜濃度，于385 nm處測定吸光度，計(jì)算樣品中血紅素提取率及純度。